Varian固相萃取小柱回收率低的原因及解決方法
更新時(shí)間:2020-05-26 點(diǎn)擊次數(shù):1343次
Varian固相萃取小柱為具有強(qiáng)陰離子交換功能和反相色譜疏水作用的混合型吸附劑,含有季銨功能基團(tuán),通常用于在堿性和中性雜質(zhì)中分離純化酸性物質(zhì),如正磷酪胺酸,雌激素酮,腺嘌呤和核苷等。聚合物基質(zhì)Welchrom? P-SAX可耐受很多的有機(jī)溶劑,對水溶液,在pH 0-14范圍均穩(wěn)定。
1、可能原因:載樣時(shí)流速過快
解決方法:重力自然載樣或控制載樣流速≤1mL/min。
2、可能原因:SPE小柱太小
解決方法:用更大規(guī)格的SPE小柱;用選擇性更強(qiáng)的SPE小柱;用載樣量更大的SPE小柱。
3、可能原因:固相萃取小柱洗脫前SPE小柱清洗溶劑抽干不充分。
解決方法:充分抽干沖洗溶劑
4、可能原因:洗脫不充分
解決方法:增加洗脫劑的體積,增加洗脫劑的強(qiáng)度;用更小規(guī)格的SPE小柱。
5、可能原因:柱活化條件不恰當(dāng)
解決方法:根據(jù)固定相的不同,正確活化SPE小柱,反相填料,正相填料,離子交換填料。
6、可能原因:固相萃取小柱樣品溶劑對目標(biāo)成分的作用力比固定相強(qiáng)
解決方法:a、選擇對目標(biāo)成分具有更強(qiáng)選擇性的SPE小柱;b、調(diào)整樣品溶劑的pH值,增加目標(biāo)成分在固定相上的作用力;c、改變樣品溶劑的極性,降低目標(biāo)成分在溶劑中的作用力。
7、可能原因:清洗溶劑選擇不當(dāng);洗脫能力太強(qiáng)
解決方法:使用正確的清洗溶劑;選擇洗脫能力更弱的溶劑。