有關(guān)C18色譜柱的安裝步驟,這里有詳細(xì)說明
更新時(shí)間:2020-11-26 點(diǎn)擊次數(shù):2883次
C18色譜柱可分為填充柱和開管柱兩大類。多為金屬或玻璃制作。有直管形、盤管形、U形管等形狀。液相色譜通常均采用填充柱。
C18色譜柱的分離效果取決于所選擇的固定相,以及C18色譜柱的制備和操作條件。
色譜是一種分離分析手段,分離是核心,因此擔(dān)負(fù)分離作用的C18色譜柱是色譜系統(tǒng)的心臟。對C18色譜柱的要求是柱效高、選擇性好,分析速度快等。市售的用于HPLC的各種微粒填料如多孔硅膠以及以硅膠為基質(zhì)的鍵合相、氧化鋁、有機(jī)聚合物微球、多孔碳等,其粒度一般為3,5,7,10μm等,柱效理論值可達(dá)5~16萬/米。對于一般的分析只需5000塔板數(shù)的柱效;對于同系物分析,只要500即可;對于較難分離物質(zhì)對則可采用高達(dá)2萬的柱子,因此一般10~30cm左右的柱長就能滿足復(fù)雜混合物分析的需要。
柱效受柱內(nèi)外因素影響,為使C18色譜柱達(dá)到*效率,除柱外死體積要小外,還要有合理的柱結(jié)構(gòu)及裝填技術(shù)。即使*的裝填技術(shù),在柱中心部位和沿管壁部位的填充情況總是不一樣的,靠近管壁的部位比較疏松,易產(chǎn)生溝流,流速較快,影響沖洗劑的流形,使譜帶加寬,這就是管壁效應(yīng)。這種管壁區(qū)大約是從管壁向內(nèi)算起30倍粒徑的厚度。在一般的液相色譜系統(tǒng)中,柱外效應(yīng)對柱效的影響遠(yuǎn)遠(yuǎn)大于管壁效應(yīng)。
C18色譜柱的安裝:
1、首先應(yīng)確認(rèn)柱和儀器的接頭以及管路是否匹配。為減少死體積,進(jìn)樣閥、柱子、檢測器之間的連接管路內(nèi)徑盡可能使用內(nèi)徑較小的管線,同時(shí)控制進(jìn)樣器、C18色譜柱和檢測器之間連接管線的長度。安裝C18色譜柱之前,確認(rèn)流路系統(tǒng)中的溶劑是否正常。對分析較復(fù)雜的樣品建議安裝保護(hù)柱。
2、為了使C18色譜柱與儀器系統(tǒng)達(dá)*的連接效果,應(yīng)盡量使用與C18色譜柱接口相匹配的螺帽和錐形接頭,如原來的接頭長期匹配其他類型的C18色譜柱,建議在連接新C18色譜柱前應(yīng)檢查匹配情況,避免造成C18色譜柱的損壞或因C18色譜柱不匹配造成的漏液。
3、使用PEEK 材料的通用接頭,只需用手?jǐn)Q緊不需要特定扳手,使用壓力為5000psi;使用溫度不得超過100℃。